第二节 分子生物学技术
1.标准的PCR过程一般分为变性、退火、延伸三大步,这三大步需要的温度依次是( )
A.94 ℃、55 ℃、72 ℃ B.72 ℃、55 ℃、94 ℃
C.55 ℃、94 ℃、72 ℃ D.80 ℃、55 ℃、72 ℃
解析:当温度上升到94 ℃(90~96 ℃)以上时,双链DNA解聚为单链,称之为变性;当温度下降到50 ℃(40~60 ℃)左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;当温度上升到72 ℃(70~75 ℃)左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,称为延伸。
答案:A
2.DNA的复制需要引物,其主要原因是( )
A.可加快DNA的复制速度
B.引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合
C.引物的5'端有助于DNA聚合酶延伸DNA链
D.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从3'端延伸DNA链
解析:DNA的两条链是反向平行的,为了明确地表示DNA的方向,通常将DNA的羟基(—OH)末端称为3'端,而磷酸基团的末端称为5'端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3'端延伸DNA链。因此,DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3'端开始延伸DNA链,DNA的合成方向总是从子链的5'端向3'端延伸。
答案:D
3.下列有关PCR反应的叙述正确的是( )
A.PCR反应所需要的引物只是RNA
B.PCR反应所需要的材料是核糖核苷酸
C.PCR反应所需要的酶在60 ℃会变性
D.PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行
解析:PCR反应需要的引物是DNA或RNA,反应所需要的材料是脱氧核苷酸,PCR所需要的酶是耐高温的,在60 ℃不会变性。
答案:D
4.有关PCR技术,下列叙述不正确的是( )
A.用于PCR的引物长度通常为15~40个核苷酸
B.在用PCR技术扩增DNA时,DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似
C. PCR反应只需一定的缓冲溶液、DNA模板以及四种脱氧核苷酸
D. PCR一般经历三十多次循环,
