1.培养基的基本成分:水、无机盐、碳源、氮源;根据有无琼脂将培养基分为固体培养基和液体培养基。液体培养基用于微生物的扩大培养,固体培养基用于微生物的分离。
2.常用灭菌方法及适用器材:(1)高压蒸汽灭菌法,如培养基、各种器皿等;(2)灼烧,如接种环、玻璃刮刀等;(3)G6玻璃砂漏斗过滤,如尿素培养基。
3.分离微生物最常用方法:划线分离法和涂布分离法(后者更容易获得单菌落)。
4.划线分离时,接种环只蘸取一次菌液,每次划线前均需灼烧接种环;接种微生物后,培养基需倒置培养。
5.脲酶分解尿素为NH3,NH3使培养基的pH升高,遇酚红指示剂变红色,通过检测红色环带大小判断脲酶的活力。脲酶分解尿素的反应式为:(NH2)2C==O+H2O2NH3+CO2。
6.分离以尿素为唯一氮源的微生物时,尿素培养基中加入琼脂糖而非琼脂(保证尿素为唯一氮源);土样从有哺乳动物排泄物的地方获取,用无菌水稀释后只取悬液。
7.任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统,都会对人体产生危害。
8.接种时,先将接种环在酒精灯火焰上烧红后冷却,然后蘸取带菌的培养物,放到新的培养基中。
9.划线分离法可用于分离细菌,将污染的杂菌除去。
10.无菌操作的首要条件是各种器皿必须是无菌的。
11.实验中所需的棉花不能用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染。
12.在将培养基转移到三角瓶和试管中时必须用三角漏斗;向培养皿中转移已灭菌的培养基时,也不要沾在壁上。