【实验指导】
一、实验原理
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
可溶性还原糖(如葡萄糖、果糖)与斐林试剂发生作用,可以生成砖红色沉淀。斐林试剂实际是Cu2+的碱性溶液,能使具有自由醛基或酮基的糖氧化,Cu2+则被还原成砖红色的Cu2O沉淀。反应式为:
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2—OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。苏丹Ⅲ在脂肪中的溶解度比在酒精中的溶解度大,当用苏丹Ⅲ的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时,酒精中的苏丹Ⅲ进入脂肪中,将脂肪染成橘黄色。
蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可以产生紫色反应。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
二、目的要求
初步学会鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。