1. 基因工程的操作程序分析
(1)目的基因的获取途径
①从自然界中已有的物种中分离出来,如从基因组文库或cDNA文库获取;②人工合成目的基因:常用的方法有反转录法和化学合成法;③利用PCR技术扩增目的基因:通过PCR技术可对已获取的目的基因进行扩增,以获取大量的目的基因。
(2)基因表达载体的构建
(3)将目的基因导入受体细胞转化
生物种类
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植物细胞
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动物细胞
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微生物细胞
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常用方法
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农杆菌转化法
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显微注射技术
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Ca2+处理法
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受体细胞
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体细胞
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受精卵
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原核细胞
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转化过程
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将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达
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将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物
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Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子
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