1.菌种特点
含有脲酶,可以通过降解尿素作为其生长的氮源。
2.培养基
用以尿素为唯一氮源的培养基培养,以LB全营养培养基为对照。
3.实验原理
(1)筛选以尿素为氮源的微生物,可使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养选择。
(2)细菌合成的脲酶能将尿素分解成NH3,致使pH升高,使酚红指示剂变红。
4.实验步骤
制备培养基:将已灭菌的LB固体培养基和尿素固体培养基分别倒入两个培养皿中,摇匀,平放至凝固
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制备细菌悬液:用1 g土样和无菌水配制不同浓度的细菌悬液
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用涂布分离法分离细菌:将不同浓度的土壤稀释液分别加入到有LB培养基和尿素培养基的培养皿中,每个浓度分别各接种到三个培养皿中,并用玻璃刮刀涂布到整个平面上
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培养:将培养皿倒置,在37 ℃恒温箱中培养24~48 h
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观察:培养基中菌落数量