命题角度3动物细胞工程及应用
1.物细胞工程技术获取克隆抗体,下列实验步骤中错误的是
A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞
B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的
细胞群,培养后提取单克隆抗体
[考场错解] C
[专家把脉] 对动物细胞工程的有关技术和要求不熟悉.认为聚乙二醇作为促融剂只能用于原生质体杂交(植物体细胞杂交),动物细胞融合用灭活的病毒作促融剂。故错选C。单克隆抗体制备的过程大致如下,主要有三步:第一步,将抗原注射到小鼠体内进行免疫,取出能产生抗体的B淋巴细胞。与小鼠骨髓细胞融合;第二步,用选择 培养基,选出杂交瘤 细胞,逐一克隆或扩增,从中挑出能产生抗体的杂交瘤细胞;第三步,将杂交瘤细胞接种在培养瓶中扩大培养或注射到动物的体 液中,作为腹腔内增殖,然后再分离纯化单克隆抗体。
在处理动物细胞时。一般用胰蛋白酶处理膜上糖蛋白。使细胞分散为单个细胞便于融合,动物细胞不含纤维素(无细胞壁)。